海藻糖检测试剂盒 100t

产品搜索

产品展示

您现在所在的位置：首页> 产品展示

产品展示

产品名称：海藻糖检测试剂盒 100t
产品型号：HZTJC
所属类别：
发布时间：2016-01-05
已获点击：212

详细说明

海藻糖检测试剂盒 100t 型号:HZTJC

库号：M156686

导言：海藻糖是一种天然存在的糖含有两个葡萄糖 ,分子约束的α ， α - 1 ， 1联系。这种结构的结果在化学性质稳定，非还原糖与许多重要的功能特点。海藻糖是常见的性质，提供了一个能源的来源，并已被证明是首要因素稳定生物体时期冻结，干燥和暖气。海藻糖是消费的一个组成部分正常饮食中的香菇，蜂蜜，龙虾，虾球和食品生产用面包和啤酒酵母。海藻糖被确定为一般公认为安全 (GRAS)（成份）作为多用途成分的所有食品中使用，包括作为甜味剂，稳定剂，增稠剂和香味剂，在一般按照目前的生产质量管理规范。它有一个独特的高玻璃化转变温度为糖，是不褐变，不会水解在低pH值或高温。这个结果，更稳定的色彩和口味的食品，它是补充。海藻糖是45 ％的蔗糖甜比较了10 ％（瓦/五）解决方案，并稳定在高达94 ％相对湿度。低吸湿性质海藻糖二水结果在自由流动，稳定的干燥产品。作为一个非还原糖不反应氨基酸或蛋白质开始拉德褐变。原则：海藻糖是水解为D -葡萄糖的海藻糖（ 1 ），以及 D -葡萄糖释放是磷酸己糖激酶的酶 (HK) （香港）与腺苷5' -三磷酸（ ATP ）对葡萄糖六磷酸（ G - 6级磷）的同时形成腺苷5' -磷酸 (ADP) (2). （二磷酸腺苷）（ 2 ）。（海藻糖） (1) Trehalose + H （ 1 ）海藻糖+ H 2 2 O ? 2 x D-glucose 2 × D -葡萄糖 (HK) （香港） (2) D-Glucose + ATP （ 2 ） D -葡萄糖+三磷酸腺苷 G-6-P + ADP G - 6级磷+二磷酸腺苷 In the presence of the enzyme glucose-6-phosphate dehydrogenase 在场的酶葡萄糖六磷酸脱氢酶 (G6P-DH), （ G6P ，卫生署）， G - 6级- p是氧化的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADP 磷酸（辅酶 + + ) ，以葡萄糖一6一磷酸的形成(NADPH) (2). 减少烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（辅酶Ⅱ ）（ G6P ，卫生署） (2) G-6-P + NADP （ 2 ） G - 6级磷+辅酶 + + 葡萄糖一6一磷酸+核苷酸+ H + + 数额核苷酸形成在这一反应是计量与数额为D -葡萄糖，从而与金额两倍的 1 海藻糖. 这是核苷酸是衡量增加吸光度在340 nm左右。特异性强，灵敏度，线性度和: 该法是具体的海藻糖。的鉴别吸光度的测定是0.010 吸光度单位。这相当于3.45 mg / L的样品溶液在样本量的0.20毫升（即浓度18.976毫克/毫升. 样品前解决硼减少）。检测限为37.52 mg / L的样品溶液（前硼减少),这是源于不同的0.020吸光度与. 样本量为0.2毫升。检测线性范围为4至80微克每测定海藻糖。重复使用一个样本确定的解决办法，一个吸光度差异为0.005至0.010 ，可能会发生的样本量0.20毫升，这相当于海藻糖浓度约9.488到18.976 mg / L的样品溶液（前硼 reduction). 减少）。如果样品稀释样品制备过程中（以及因为这是发生在硼减少一步），其结果是乘以稀释因素如果在样品制备，样品是体重，如10克/升，相差0.02至0.05 g/100克可.预期。干扰如果水解海藻糖和转换的D -葡萄糖的已完成指定的时间内，在检测（约5分钟每个孵化），可以大致得出结论认为，没有干扰发生。然而，这还可以进一步检查添加海藻糖或D -葡萄糖（约40微克的无论是在0.2毫升），以在完成了盆地的反应。大量增加吸光度应得到遵守。干扰物质的样品正在分析可确定由包括一个内部标准。定量恢复本标准预计将。损失的样品处理和提取被确定表演复苏实验即. 加入海藻糖的样品中提取的最初步骤。安全：试剂用于测定海藻糖不有害物质意义上的有害物质条例。然而，缓冲区集中包含叠氮化钠（ 0.02 ％瓦特/五）作为防腐剂。一般安全的措施，适用于所有的化学物质应遵守。 2 包：包适合表演100化验可从Megazyme 。这些教材包括了全面测定方法加上：瓶1 ：咪唑缓冲液（ 45毫升， 2男， pH值为7.0 ），加上镁酰氯（ 100毫米）和叠氮化钠（ 0.02 ％瓦特/ V ）的作为防腐剂稳定的“ 2年 4 4 °C 摄氏度 . 瓶2 ： NADP 辅酶 + + （ 150毫克）加三磷酸腺苷（ 440毫克）。稳定的“ 5年内在-20 °C 摄氏度。瓶3 ：己糖激酶（ 425 U / ml的）加葡萄糖六磷酸脱氢酶（ 212 U / ml的）暂停， 2.25毫升。稳定的“ 2年4 °C 摄氏度。瓶4 ：海藻糖暂停（ 2.25毫升， 490 U / ml的）。稳定的“ 2年4 ° C的一瓶5 ：D -葡萄糖标准溶液 (5 mL, 0.4 mg/mL) （ 5毫升， 0.4毫克/毫升）的0.2 ％（宽/ V ）的苯甲酸。稳定的“四年在室温下。瓶6 ：海藻糖（ 2克）。稳定的“四年在室温下。制备试剂解答/悬浮： 1 。使用内容提供的1瓶。表“ 2年4 ° C的 2 。 D issolve的内容， 2瓶12毫升的蒸馏水。分为适当大小的等分试样和商店聚丙烯管在-20 °C 摄氏度之间的使用和凉爽使用。一旦解散，该试剂是稳定的“ 2年在-20 °C 摄氏度。使用的内容，第3和第4瓶的供应。在打开前次动摇瓶删除任何蛋白质，可能有解决的橡胶瓶塞。随后，储存瓶直立。稳定的“ 4年4 ° C 5 。使用的内容提供了5瓶。稳定的“四年在室温下。 6 解散200毫克海藻糖在1升的蒸馏水。添加0.2毫升的这种化验检查活动海藻糖酶稳定的“ 4年 at -20 在-20 °C 摄氏度 3 4 注意： D -葡萄糖标准溶液（解4 ）和海藻糖编制（方案5 ）只有当检测是一些疑问的准确性正在分光光度计使用或在怀疑其抑制正在造成的物质的样品。海藻糖的浓度是确定直接从消光系数的核苷酸 (page 6). （第6页）。所需试剂（不附后）： 1. 试剂1 。氢氧化钠（ 50毫米）解散二点〇克氢氧化钠在900毫升的蒸馏水。调整音量，以1公升。储存在室温下。 2. 试剂2 。碱性硼（ 10毫克/毫升钠 ) 硼在50毫米氢氧化钠）. 准确的重量约50毫克的硼氢化钠（六西格玛猫。 No.S-9125) ）到聚丙烯容器（ 10毫升容积 with screw cap). 与螺丝帽）确切的重量纪录的管，密封管和存放在干燥器硅胶，供今后使用。当权衡硼，建议约10手准备方便。立即使用之前，解散了硼氢化钠浓度为10毫克/毫升在50毫米氢氧化钠（试剂1 ）这个解决方案是稳定4-5小时室温度。 3 试剂3 冰醋酸（ 200毫米）新增6月11日毫升冰醋酸600毫升蒸馏水和调整音量，以1公升。储存在室温下。设备（建议） 1 。玻璃试管（轮触底; 16 × 100毫米）。 2 性塑料（ 1厘米光路， 3.0毫升） 3 体积瓶（ 50和100毫升的能力）。 4 微型，如吉尔森移液器 ? （ 20 μL和100 μL ）。 5 正位移如? -用5.0毫升 ? （免除0.2毫升等分试样的咪唑缓冲液和0.1毫升等分试样的辅酶 + /三磷酸腺苷的解决方案）。 -与25毫升 ? （免除2.0毫升等分试样的蒸馏水）。 6 分析天平。 7 分光光度计定为340纳米。

8 。旋涡混合器（例如试管沙克尔TTS2 ）。9 瓦特曼一号（ 9厘米）过滤文件。程序：波长： 340纳米盆地： 1厘米的光路（玻璃或塑料）温度： 25 ℃ 数量：2.54毫升样品溶液： 4-80微克海藻糖或D -葡萄糖每盆地（ 0.20毫升样本中量）阅读空气（无盆地中的光路），或对水移液器到空白样品蒸馏水（在25 ° C ） 2.20毫升 2.00毫升样品溶液 - 0.20毫升解决方案1 （咪唑缓冲） 0.20毫升 0.20 mL 0.20毫升解决方案2 （辅酶 + + /ATP) /三磷酸腺苷） 0.10毫升 0.10毫升暂停3 （ HK/G-6-PDH ） 0.02毫升 0.02毫升(A 混合* ，读取吸光度的解决方案（甲 1 ）后约 5分钟并启动反应的加入：暂停4 （海藻糖） 0.02毫升 0.02毫升混合* ，读取吸光度的解决方案（甲 2 2 ）结束时的反应（约5分钟）。如果反应没有停止5分钟后，继续阅读吸光度在2分钟的间隔，直至吸光度保持不变，超过2分钟例如，塑料铲，或温柔反转后密封该盆地的盆地帽或石蜡 ? 。如果吸光度继续增加，这可能是由于影响彩色化合物或酶的样本。这些干扰物质可能会删除在样品制备。 5 计算公式：确定吸光度差异（阿 2 2 -A 一 1 ）为空白样品。减去吸光度差异的空白从 ?A 吸光度差异的样品，从而获得ΔA 海藻糖。 ?A 货值ΔA 海藻糖应作为一项规则至少0.100 吸光度单位实现足够的结果。海藻糖的浓度可以计算如下： ? = V x兆瓦 × 1.1 x ΔA 海藻糖 [ g / L的] ε xdxvx 2 0.2 其中： V = 量[毫升]
兆瓦=分子量海藻糖[克/摩尔]
ε =消光系数的核苷酸在340纳米
= 6300 [勒克斯摩尔 -1 -1 x厘米 -1 ]
d =光路[厘米] v =样本量[毫升] = 2分子D -葡萄糖释放出来的每一分子海藻糖水解 1.1/0.2 = 0.2毫升样品提取物治疗硼和量治疗后失效 1.1毫升它的海藻糖如下： ? = 2.54 x 342.3 × 1.1 x ΔA 海藻糖 [ g / L的] 6300 x 1 x 0.2 x 2 6300 × 1 × 0.2 × 2 0.2 0.2 = = 1.8976 x ΔA 海藻糖 [ g / L的] 如果样品已经稀释制备过程中（除参与硼减少一步），其结果必须是乘以稀释因素，楼在分析固体和半固体样品的体重了对样品制备，内容（ g/100 ）是计算出来的数额权衡如下：内容海藻糖 = ? 海藻糖 [ g / L的样品溶液] × 100 [ g/100克] 重量样品 [ g / L的样品溶液] 6
在分析或纯海藻糖浓度海藻糖是显着大于自由D -葡萄糖的硼减少步骤可省略。 In 在这种情况下，浓度的海藻糖可以计算如下： ? = = 2.54 x 342.3 x ?A 2.54 x 342.3 x ΔA trehalose 海藻糖 [g/L] [ g / L的] 6300 x 1 x 0.2 x 2 6300 × 1 × 0.2 × 2 = = 0.3450 x ?A 0.3450 x ΔA trehalose 海藻糖 [g/L] [ g / L的] 如果样品已经稀释制备过程中，其结果必须是乘以稀释因素，当在分析固体和半固体样品的体重了对样品制备，内容（ g/100 g ）是计算出来的数额权衡如下：内容海藻糖 = ? 海藻糖 [ g / L的样品溶液] × 100 [ g/100克] 重量样品 [ g / L的样品溶液] 样品制备：1 。样品稀释。海藻糖的数量目前在盆地（即在0.2毫升样本正在分析）应介于4和80微克。因此，样品溶液前硼减少步骤必须稀释足以产生海藻糖浓度之间的0.12和2.4克/研究稀释表估计浓度稀释稀释海藻糖（ g / L的）水 (F) 因子（女） < 2.4 “ 没有稀释要求 1 2.4-24 1 + 9 10 24-240 1 + 99 100 如果该值的ΔA 海藻糖太低（如“ 0.100 ），重量更多样品或稀释不到强烈。 7 注意：这些计算可以简化使用超级计算 TM 商标 ,，从那里的产品出现在 1. 样品制备和提取物的去除自由D -葡萄糖答：海藻糖提取：磨干样品通过0.5毫米屏幕;减少固体脂肪样本（如巧克力）到精细的品种，以尖刀;分析软食物产品（如利差）没有进一步的准备。所有样本应是在室温条件下，才权衡。样品含有0-12 ％海藻糖 1 。正确权衡a。一点〇克样品变成干硼硅烧杯（ 100毫升的能力），并添加40毫升的热蒸馏水（ 80 ℃ ）。广场上的烧杯磁搅拌器搅拌和15分钟（即，直到样品完全分散）。 2 。定量转移解决了50毫升的容积瓶。调整音量的标志用蒸馏水，混合内容全面，让冷却到室温。重新检查的数量和调整的标志，如果用蒸馏水必要的样品含有12-40 ％海藻糖 1 。准确重量约 500毫克的样品变成干硼硅烧杯（ 100毫升的能力），并添加80毫升的热蒸馏水（ 80 ℃ ）。广场上的烧杯磁搅拌器搅拌15分钟（即，直到样品完全散去。 2 。定量转移解决了100毫升容积瓶。调整音量的标志用蒸馏水，混合内容全面，让冷却到室温。重新检查的数量和调整的标志，如果用蒸馏水 . 必要的。进一步治疗提取物 3.过滤器的aliquot的解决方案通过瓦特曼第1号（ 9厘米）过滤器循环。这个解决方案可能会稍微混浊，取决于性质样本提取。分析这一解决方案，立即或储存在4 ℃ ，直至分析。如果浊度形式解决，过滤它再分析。除去除还原糖：答：准确免除了0.2毫升aliquot的解决办法的分析（含约0.2至2.4毫克/毫升的海藻糖）进入底部玻璃试管（ 16 × 100毫米）。注：样品含有40-100 ％海藻糖，调整量以250毫升。
b. 加入0.2毫升试剂2 （碱性硼解）的管搅拌混合大力和储存在40 ° C 30分钟完成效果减少减少糖，以糖醇。 c. 添加0.5毫升试剂3 （ 200毫米乙酸）的管大力搅拌的旋涡混合器。一个充满活力的冒泡 s . 应得到遵守。（此治疗删除多余的硼并调整pH值约4.5 。） d. 在5分钟，加入0.2毫升的解决方案1 （ 2男咪唑缓冲液， pH值7.0 ）调整pH值的解决办法的约。 7 。这是样品溶液，并应分析所描述 2. 制备样品提取物不，需要去除D -葡萄糖答：海藻糖提取：磨干样品通过0.5毫米屏幕;减少固体脂肪样本（如巧克力）到精细的品种，以尖刀;分析软食物产品（如利差）没有进一步的准备。所有样本应是在室温条件下，才权衡。样品含有0-12 ％海藻糖 1 。准确重量约。一点○克样品变成干硼硅烧杯（ 300毫升的能力），并新增200毫升热蒸馏水 ( 80°C). （ 80 ℃ ）。广场上的烧杯磁搅拌器搅拌和15分钟（即直到样品完全分散）。 2 。定量转移解决250毫升容积瓶。调整量的标志用蒸馏水和混合内容全面，让冷却到室温。重新检查的数量和调整的标志，如果用蒸馏水必要的。 S样品含有12-40 ％海藻糖 1 。准确重量约。 250毫克的样品变成干硼硅烧杯（ 300毫升的能力），并新增200毫升热蒸馏水 (80°C). （ 80 ℃ ）。广场上的烧杯磁搅拌器搅拌15分钟（即，直到样品完全散去。 2 。定量转移解决250毫升容积瓶。调整音量的标志用蒸馏水，混合内容全面，让冷却到室温。重新检查的数量和调整的标志，如果用蒸馏水 . 必要的。 9 s 注：样品含有40-100 ％海藻糖，调整音量以500毫升。
进一步治疗提取物 3 过滤器的aliquot的解决方案通过瓦特曼第1号（ 9厘米）过滤器循环。这个解决方案可能会稍微混浊，取决于性质样本提取。这是样品溶液和应立即分析说明第5页。分析这一立即解决，或贮存在4 ℃ ，直至分析。如果浊度形式的解决方案，筛选，再分析。 10 10 0.00 0.00 0.25 0.25 0.50 0.50 0.75 0.75 1.00 1.00 1.25 吸光度， 340纳米 0.00 0.00 2.00 2.00 4.00 4.00 6.00 6.00 8.00 8.00 1 0 . 1 0 。 0 0 0 0 1 2 . 1 2 。 0 0 0 0 培养时间 F 图1 。测量使用海藻糖海藻糖酶。答：孵化混合物海藻糖（ 100微克），但没有海藻糖酶。湾孵化混合物海藻糖（ 100微克）和海藻糖酶（ 9.8 ü ）。 A 字母a B 乙

东方化玻(北京)科技有限公司

产品搜索

产品展示

客服中心

客服电话：

在线联系方式：